24. dzień to klaustrofobiczny thriller psychologiczny, w którym wdowiec zakażony HIV bierze zakładnika — mężczyznę, którego obwinia o zniszczenie swojego życia — i przez całą dobę rozlicza go z przeszłości.

Tom (Scott Speedman) jest heteroseksualnym wdowcem żyjącym z HIV, który pewnego wieczoru poznaje Dana (James Marsden) w barze i zaprasza go do swojego mieszkania. Gdy obaj mężczyźni są już sam na sam, Tom ujawnia, że pięć lat wcześniej mieli jednorazowy kontakt seksualny — jedyny homoseksualny epizod w jego życiu. Tom jest przekonany, że to właśnie Dan zaraził go wirusem, który pośrednio doprowadził do śmierci jego żony.

Napędzany żądzą zemsty i latami tłumionego bólu, Tom przetrzymuje Dana jako zakładnika przywiązanego do krzesła, pobiera jego krew na test i grozi mu śmiercią, jeśli wynik okaże się pozytywny. 24. dzień rozgrywa się niemal w całości w czterech ścianach mieszkania z zabitymi oknami, zamieniając klaustrofobiczną przestrzeń w arenę starcia między winą, seksualnością i odpowiedzialnością. Między dwoma mężczyznami toczy się brutalna, psychologiczna rozgrywka — Tom chce sprawiedliwości, Dan walczy o życie, a prawda o przeszłości stopniowo wypełza na powierzchnię.